細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從大小來講,細(xì)胞培養(yǎng)瓶約可分為約600ml,250ml,50ml和25ml的,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。600ml 、300ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),50ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實驗提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。當(dāng)然還有其他如圓形的等,都可根據(jù)個人愛好和實驗需要自己選擇。
根據(jù)細(xì)胞培養(yǎng)瓶制作材料的不同,也有玻璃和塑料之分,這里談一點自己的淺見。不同的細(xì)胞對胰酶的敏感度不一樣,所以在實驗中我們常常會遇到一些細(xì)胞消化半天也沒有起色,導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不斷下滑,直至zui后的死亡以至于實驗進(jìn)展的不順利。當(dāng)然,有時候是可以通過加一些EDTA等來增強胰酶的能力,或者提高胰酶的濃度來實現(xiàn),在培養(yǎng)一些細(xì)胞過程中,我發(fā)現(xiàn),一些細(xì)胞對玻璃和塑料制品粘附能力不同,如RAW264.7,平滑肌細(xì)胞等,在轉(zhuǎn)換培養(yǎng)瓶之后,可以發(fā)現(xiàn)好消化了很多,并且在回到原制品的培養(yǎng)瓶時不會改變它的貼壁能力。這里希望有經(jīng)驗的戰(zhàn)友可以分享你們的經(jīng)驗。
關(guān)于培養(yǎng)板的購買其實也沒有什么經(jīng)驗,想說的就是要盡量避免購買國產(chǎn)的培養(yǎng)板,國產(chǎn)的一些培養(yǎng)瓶還可以,但是培養(yǎng)板我們買過很多國產(chǎn)的,確實效果不是很好,細(xì)胞在里面基本上長的非常非??拇~。所以經(jīng)費富余的情況下,這些東西能買進(jìn)口的就買吧。大公司的基本都可以買,BD,Corning等等。這些東西原則上是一次性的,但是我們大部分實驗室根本不可能做到,其實泡酸,洗干凈再用也沒問題,畢竟我們沒有老外那么富足的經(jīng)費,所以我們就累點吧,多做點體力活鍛煉一下身體吧。
細(xì)胞培養(yǎng)耗材有好多牌子,的是Corning Costar、Nunc和BD Falcon三個牌子;較好的有德國的Greiner和瑞士的TPP,這兩個牌子比較前面的三個主要劣勢是在產(chǎn)品種類單一和度不夠,另外質(zhì)量方面也可能有一些差距;再下面就是Orange等一些雜牌子了,無論質(zhì)量還是度都差距較大。
因為國內(nèi)目前主要還是Corning Costar,Nunc和Falcon三家的天下,下面就分別講講他們各自情況:
Corning Costar
這本來是兩家公司,Corning是美國的一個世界500強公司,下面有一堆業(yè)務(wù),涉及光纖、玻璃、陶瓷等各個領(lǐng)域。它的Life Science部門則作的是細(xì)胞培養(yǎng)耗材、移夜器、過濾等一系列的實驗室產(chǎn)品;后Corning收購了Costar的細(xì)胞培養(yǎng)耗材這塊業(yè)務(wù),合稱Corning Costar。
Corning(Costar)的質(zhì)量是同類產(chǎn)品中的,幾乎沒聽說過投訴它質(zhì)量的;它的產(chǎn)品線也全,其它牌子有的幾乎它都有(除了BD的IVF和BioCoat,以及Nunc的多層培養(yǎng)瓶個別幾個產(chǎn)品),它自己也有一些有特色的東西,比如Costar的Transwell,Corning的塑料試劑瓶和過濾器。此外,Corning在國內(nèi)做的時間也zui長,度高,客戶基礎(chǔ)好。
Nunc
Nunc,一個丹麥的牌子。95年的時候和Nalgene合并,Nalgene大家肯定都聽說過,幾乎每個新建實驗室都會買Nalgene,大家賣Epp的離心機時是肯定經(jīng)常會碰到老師要求配大離心管的,哪些都是Nalgene的。國內(nèi)前兩年做得不錯,不過現(xiàn)在好像不怎么樣了,估計主要還是價格下不來,另外還有個分銷商的問題,它現(xiàn)在的代理商是Invitrogen,下面好像就亂放分銷商了,這些分銷商良莠不齊,賣得掉的亂報高價,賣不掉的就亂降價。不過Nunc還是個很好的牌子,產(chǎn)品很全,另外它的酶標(biāo)板很有優(yōu)勢,F(xiàn)alcon和Corning都沒得比,估計也只有Greiner和它有一拼。現(xiàn)在沒做好的原因主要還是代理商。
BD Falcon
Falcon應(yīng)該叫做Discovery Labware。這個Labware的供應(yīng)商那就是美國的BD公司了。BD公司比前兩家的Corning和Apogent也絲毫不差,一家百年老店,進(jìn)過500強。BD Bioscience(BD 的生命科學(xué)部分)好幾個產(chǎn)品:Pharmingen、Clontech和Discovery Labware。Discovery Labware本來只有Falcon,后來加了Biocoat,前段時間BD收購了Genetest,也算在了Labware的下面,但其中zui主要的就是Falcon。據(jù)BD說,F(xiàn)aclon是這個領(lǐng)域里zui早的牌子,國外占有率zui高,一年能賣上億美金,Corning什么的都是后來者,沒得比。另外BD在培養(yǎng)器皿的處理方面很有一套,據(jù)她的技術(shù)人員說,這些培養(yǎng)器皿都是在密閉環(huán)境下處理,表面處理更均一;其它牌子都是在一個開放的環(huán)境下進(jìn)行的處理,相對來說就差一些;另外Falcon的包裝不錯,是雙層的,有一些中間商就會為了這點要選Falcon,因為這樣的包裝適合長途運輸。