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植物ELISA試劑盒技術(shù)可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
ELISA方法中有二個(gè)必要的試劑:
(1)固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
(2)酶符號(hào)的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);
一般可將植物Elisa試劑盒分為以下幾種類型,首要需求根據(jù)自己的待檢物來判定試劑盒類型。
1)雙抗體夾心法:針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測(cè)抗體。適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子,不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原。同理,也有雙抗原夾心法測(cè)抗體。
2)直接法:將抗原直接固定在固相載體上,參與酶符號(hào)的一抗,即可測(cè)定抗原總量。此法操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無須運(yùn)用二抗可防止交互反響。
3)間接法:間接法是檢測(cè)抗體常用的方法,其原理為運(yùn)用酶符號(hào)的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)來檢測(cè)與固相抗原結(jié)合的待檢抗體。
4)競(jìng)爭(zhēng)法:小分子抗原或半抗原因短少可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn),因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測(cè)定,能夠選用競(jìng)爭(zhēng)法形式。當(dāng)抗原材猜中的攪擾物質(zhì)不易除掉,或不易得到滿足的純化抗原時(shí),可用此法檢測(cè)特異性抗體。