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技術(shù)文章ARTICLE
進(jìn)口ELISA試劑盒具有靈敏性高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn),那怎樣防止ELISA試驗(yàn)過(guò)程中的過(guò)錯(cuò)呢?
*:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事試驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作試驗(yàn)儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問(wèn)題的能力,對(duì)試驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。
第二:操作前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū),嚴(yán)厲依照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的地方,重復(fù)試驗(yàn)確認(rèn)建立后才干改善,比如洗板次數(shù)的掌握等。
第三:評(píng)價(jià)試劑的實(shí)用性,試劑的安穩(wěn)與否,對(duì)率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品重復(fù)比照試驗(yàn),判定試劑符合要求后方可使用。
第四:加樣要、快速。加樣不,酶生成物的量不能確認(rèn),直接影響顯色成果。另外,顯色的深淺及A值的測(cè)定與參加顯色劑和終止液的量有關(guān),所以加樣應(yīng)慎重。要求在必定時(shí)間內(nèi)加樣完畢的試驗(yàn),假如加樣緩慢,便呈現(xiàn)差錯(cuò),而且試劑長(zhǎng)期露出在外,尤其室溫過(guò)高時(shí),保存期會(huì)縮短乃至失效。
第五:使用校對(duì)過(guò)的微量移液器,掃除天然差錯(cuò)。移液器與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要
第六:嚴(yán)厲掌握顯色時(shí)間,顯色時(shí)間過(guò)短,參加終止液反應(yīng)終止后,底物結(jié)合物的量過(guò)少,易呈現(xiàn)假陰性。超越顯色要求時(shí)間后顯色,應(yīng)判為假陽(yáng)性,這或許與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當(dāng)即顯色,不行報(bào)陽(yáng)性,這或許是本底顯色的成果。
第七:洗滌*,洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。另外,洗滌液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也或許呈現(xiàn)假陽(yáng)性。
第八:進(jìn)口ELISA試劑盒嚴(yán)控反應(yīng)時(shí)間,反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),酶失活;反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松懈不結(jié)實(shí),容易洗掉,都或許形成假陰性。